吉大港红牛卵巢卵泡波和主要激素分布的调查

摘要：吉大港红牛（RCC）是著名的牛品种之一，是孟加拉国本土和最具潜力的家畜遗传资源类型，具有鲜明的表型特征。生殖管理可能是繁殖这种牛品种的过程。因此，本研究的目的是表征 RCC 的卵泡波并确定孕酮（P 4)、三个连续发情周期中的促卵泡激素 (FSH) 和促黄体激素 (LH) 分布。使用经阴道超声技术确定卵泡波出现（第 0 天），然后在三个连续的发情周期中从第 0 天到第 23 天监测卵泡生长并收集血液样本。在测量卵泡的生长和直径后，使用酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 对收集的血液样本进行激素测定。我们发现，RCC 奶牛和小母牛都表现出两波排卵间隔。RCC奶牛和小母牛的排卵间隔长度和排卵卵泡直径略有不同。优势卵泡的识别是从它开始偏离其他从属卵泡开始，直到它达到最大直径并被确定为优势卵泡，其线性增加约六天（生长期）。这个优势卵泡在五天（静态阶段）内保持大致相同的大小，然后开始退化（退化阶段），减少窦直径。对于 RCC 奶牛和小母牛，大约在第 0 天和第 10 天，卵泡波首先可检测为 4-5 毫米的卵泡，显示出两次排卵间隔。循环中不同浓度的 LH、FSH 和 P 这个优势卵泡在五天（静态阶段）内保持大致相同的大小，然后开始退化（退化阶段），减少窦直径。对于 RCC 奶牛和小母牛，大约在第 0 天和第 10 天，卵泡波首先可检测为 4-5 毫米的卵泡，显示出两次排卵间隔。循环中不同浓度的 LH、FSH 和 P 这个优势卵泡在五天（静态阶段）内保持大致相同的大小，然后开始退化（退化阶段），减少窦直径。对于 RCC 奶牛和小母牛，大约在第 0 天和第 10 天，卵泡波首先可检测为 4-5 毫米的卵泡，显示出两次排卵间隔。循环中不同浓度的 LH、FSH 和 P4在母牛和小母牛的情况下使用 ELISA 确定，浓度曲线在发情周期期间遵循类似的变化模式。因此，有关卵巢滤泡波的知识将为 RCC 的生殖管理奠定基础，并允许生殖生物技术改进和繁殖这种牛品种。

关键词

吉大港红牛,卵巢 卵泡,黄体酮,促卵泡激素,促黄体激素, ELISA

一、简介

红吉大港牛 (RCC) 是孟加拉国本土的牛。在所有其他本土牛品种中，RCC 是 1990 年代发现的有前途的牛品种之一，并因其独特的表型特征和对炎热潮湿气候环境的适应性能力而吸引人。它具有很高的抗病能力，尤其是在农村生产系统下，需要的投入支持低于杂交品种，并生产高质量的牛奶和牛肉 [ 1]。此外，它比其他在热带气候条件下的土著和杂交品种显示出更多的繁殖潜力。然而，由于杂交育种，该潜在品种目前处于濒危状态。因此，生殖管理可能是繁殖这种牛品种的过程。有关卵巢滤泡波的知识将为 RCC 的适当生殖管理奠定基础。

奶牛的卵巢卵泡生长呈波浪状。在卵泡动态波期间，一组卵泡发生同步生长，其中一个成为主导并获得最大直径，抑制从属较小的卵泡 [ 2 ]。卵巢卵泡超声检查发现奶牛发情周期最多有两三个卵泡波[ 3]。很明显，优势卵泡的鉴定报告从其开始偏离其他从属卵泡直到达到最大直径并被确定为优势卵泡，线性增加约六天（生长期），五天保持大致相同的大小（静态阶段），然后开始退化（退化阶段）减小胃窦直径。卵泡波首先可检测为 4 - 5 毫米卵泡，大约在第 0 天和第 10 天为两个波，在第 0、9 和 16 天为三个波排卵间隔 [ 4 ]。因此，为了检查怀孕绵羊的家畜繁殖 [ 5]，超声检查被用于生殖研究的不同领域，包括卵泡成分、排卵、黄体发育、子宫检查和胎儿成像 [ 6]。尽管如此，很难追踪活体动物卵巢中孤立卵泡的成分。超声检查已被用于观察家畜卵巢中的卵泡发育。这些检查揭示了在每个发情周期中都会出现间歇性的推进，在此期间，应征入伍的卵泡会不断增长。这些形成波包括发育卵泡的登记、优势卵泡的确定和排卵。卵泡改善的涌入是由促性腺激素开始的。奶牛的发情期基本上由中枢神经系统、垂体和卵巢输送的激素控制。由中枢神经系统释放的促性腺激素释放激素 (GnRH)，激活最重要的垂体释放两种促性腺激素，如促卵泡激素 (FSH) 和促黄体激素 (LH)。两种激素都控制卵巢容量。FSH 开始卵泡的发育，LH 促进颗粒细胞和鞘细胞的排卵和黄体化。7 ]。黄体 (CL) 分泌的另一种重要激素是黄体酮 (P 4 )，它可以维持牛的妊娠。正确识别 RCC 的卵泡波并澄清发情周期期间循环 LH、FSH 和 P 4浓度的关联将确保增强繁殖，这对于任何物种的世代传播都是必需的。由于孟加拉国的 RCC 是一种很有前途的牛基因型，具有一些潜在的繁殖能力，因此该品种的繁殖是后续肉、奶等产量努力的开始。因此，本研究的目的是表征卵巢滤泡波并确定循环 LH、FSH 和 P 4。

2。材料和方法

2.1。动物和地点

该研究是在达卡萨瓦尔贾汉吉尔纳加尔大学生物技术和基因工程系进行的；2018 年 10 月至 2019 年 3 月，孟加拉国家畜研究所 (BLRI) 生物技术部和 BLRI 的牛研究群。 RCC 奶牛 (n = 5) 和小母牛 (n = 5)，体重和年龄为 200 公斤，本实验分别使用150公斤和4岁、2岁。整体身体状况良好，所有动物都处于正常发情期。这些动物在半集约化系统中饲养，每天放牧 6 小时，并在早晚补充浓缩物（体重的 1%）。随意提供水和矿物舔舐。所使用的动物方案已获得 BLRI 有​​关当局的批准。

2.2. 实验设计

2.2.1。卵泡和黄体动态观察

通过直肠触诊和经阴道超声检查确认所选动物的生殖状况。使用本田电子有限公司生产的名为 HS-2200V 并配备 7.5 MHz 探头的实时 B 模式超声扫描仪进行卵巢卵泡动力学和经阴道超声检查。对未怀孕的青春期牛和预计处于发情期的牛进行超声检查。扫描卵巢是否存在黄体和/或卵泡。在连续三个自然发情周期中每天进行超声检查，从前一个周期的第 17 天开始，到下一个周期的第 4 天结束。每次检查都是在动物在溜槽中时进行的。超声检查前未触诊生殖道。每次检查都保持以下程序。所有设备和手都用酒精适当清洁，并戴上长手套。超声检查由训练有素的技术人员完成。从直肠中取出粪便。左手插入直肠，非常轻柔地抓住卵巢。将阴道换能器插入直肠。每个卵巢在多个平面上扫描数次，首先在横向到内侧方向扫描，然后在内侧到横向方向扫描。在第二个方向扫描卵巢，如背腹侧、中间斜位或在某些情况下是头尾侧。从直肠中取出粪便。左手插入直肠，非常轻柔地抓住卵巢。将阴道换能器插入直肠。每个卵巢在多个平面上扫描数次，首先在横向到内侧方向扫描，然后在内侧到横向方向扫描。在第二个方向扫描卵巢，如背腹侧、中间斜位或在某些情况下是头尾侧。从直肠中取出粪便。左手插入直肠，非常轻柔地抓住卵巢。将阴道换能器插入直肠。每个卵巢在多个平面上扫描数次，首先在横向到内侧方向扫描，然后在内侧到横向方向扫描。在第二个方向扫描卵巢，如背腹侧、中间斜位或在某些情况下是头尾侧。

2.2.2。主要激素测定的血液采集和处理

在用浸有外科手术酒精的棉签擦拭颈静脉区域后，将受试动物物理约束在服务滑槽中，并从颈静脉收集 3 ml 血液到含有凝块激活剂（BD Vacutainer 肝素钠，美国富兰克林湖）的真空采血管中。凝块激活剂红头管标有动物识别号和收集日期。在整个研究过程中每天对牛进行采血，从黄体消退开始的一段时期（通过超声检查监测）在下一个周期的第 2 天中午结束 [ 3]。使用 10 ml 注射器将用于孕酮、促卵泡激素 (FSH) 和促黄体生成素 (LH) 水平分析的血样 (3 ml) 从颈静脉收集到带有凝块激活剂的 6 ml 采血管中。然后将装有血样的收集管放在冰盒中快速凝固 15 分钟。然后将血样在 4°C 温度下以 3000 rpm 离心 10 分钟，提取的血清储存在 -20°C 直至通过 ELISA 进行激素分析。

2.3. 用于测量卵泡和黄体生长的图像分析

每次超声检查都记录在录像带上，并保存图像以供分析。所有文件都根据各自的日期收集为母牛和小母牛。因此，在扫描仪的屏幕上查看了录像带，并在图表中显示了每个卵巢的卵泡和黄体的相对位置。测量卵泡以遵循在整个发情周期期间单个卵泡的生长和消退模式。所有超声检查和录像带的审查均由一名操作员进行，他是超声扫描仪的专家 [ 3 ]。

2.4. 荷尔蒙检测

P 4 、FSH 和 LH 的循环浓度通过 ELISA 测定，使用由 Monobind Inc. 提供的商业 ELISA 试剂盒，Lake Forest, CA 92630, USA 在 SAARC 孟加拉国家畜研究所 (BLRI) 的 PPR 区域领先诊断实验室，遵循制造商提供的程序。LH、FSH 和 P 4的检测灵敏度分别为 0.5 mIU/ml、0.4 mIU/ml 和 0.105 ng/ml 。根据制造商的说明进行质量控制。

2.5. 统计分析

使用不同的方法处理卵泡波和优势卵泡 (DF) 特征以及 CL 生长特征的数据 [ 8 ] [ 9 ]。简而言之，发情周期的长度被确定为排卵之间的间隔。当单个卵泡的大小达到直径≥ 2 mm 时，会对其进行识别和跟踪。在几天内对个体卵泡生长进行评分。卵泡发育至≥2 mm的日子被定义为波浪出现的日子。卵泡偏差被定义为波浪出现后最大卵泡之间生长速率差异变化的开始，并且根据前面描述的方法被认为是卵泡选择的关键组成部分 [ 10]。分析生长速率、最大直径和闭锁发生天数。从具有可测量直径的卵泡第一次出现到记录最大直径并定义为生长期的最后一天，以及从最大直径下降之日到最后可测量大小之日的时间观察到的被定义为回归阶段。DF被定义为直径> 8 mm且比其他卵泡至少大2 mm的最大卵泡。排卵日定为超声确定排卵日；排卵被定义为优势卵泡消失，随后发展出先前被排卵优势卵泡占据的 CL。发情周期由 P 的天数定义4水平在发情前期从 <2 下降到 ≤1 ng/ml，在发情期下降到 <1 ng/ml，在发情中期从 2 逐渐增加到 <4 ng/ml，根据之前的研究，在发情期维持 ≥4 ng/ml描述的研究 [ 11 ] [ 12 ]。在 10 只动物的三个连续发情周期期间共收集了 700 份血液样本。将样品离心并将血清保存在-20°C冰箱中用于ELISA测定。使用 Microsoft excel 将来自 ELISA 读数器在 340 - 850 nm 波长下的光密度 (OD) 转换为浓度。从 RCC 小母牛和奶牛收集的所有数据均由 Microsoft excel 分析。

3. 结果

3.1。黄体 (CL) 生长和消退的测量

通过每日超声检查，观察到 RCC 奶牛的最大黄体直径为 17.61 ± 0.67 mm，小母牛为 16.67 ± 1.32 mm（图 1和图 2）。黄体回归发生在 15.00 ± 1.50 和

图 1。RCC奶牛和RCC小母牛的黄体生长和回归曲线（平均值±标准差）。此处第 0 天表示发情日。

图 2。观察 RCC 小母牛黄体 (CL) 的生长情况。(a) 小母牛的 CL（第 14 天，直径 18.1 毫米）。(b) 小母牛的 CL（第 13 天，直径 19.1 毫米）。

RCC 奶牛和 RCC 小母牛的发情周期分别为 14.00 ± 1.50 天。在这些变量的组之间没有观察到显着差异（p > 0.05）。RCC 奶牛和小母牛的 CL 生长曲线几乎相似（图 1）。

3.2. 卵泡数和发情周期长度的测定

RCC奶牛和小母牛的发情周期长度分别为21.00±1.50和20.00±1.10天。卵泡生长模式分两波出现。对于所有的实验动物，第一个卵泡波的出现发生在排卵后的第二天，在超声上观察到 RCC 奶牛和小母牛平均分别有 8.00 ± 1.50 和 5.00 ± 1.70 个卵泡。RCC 奶牛的第一波卵泡偏差发生在 4.00 ± 1.10 天，RCC 小母牛的卵泡偏差发生在 4.00 ± 1.44 天，优势卵泡的直径分别为 8.00 ± 1.70 mm 和 8.00 ± 1.17 mm。这些变量在组间没有显着差异（p > 0.05）（表1）。RCC 奶牛的第二波卵泡生长开始于 12.00 ± 2.10 天，小母牛为 12.00 ± 1.50 天。平均为 6.50 ± 1.70 和 6.00 ± 1.90

范围

碾压混凝土牛

（平均值±标准差）

碾压混凝土小母牛

（平均值±标准差）

p 值

发情周期的持续时间（天）

21.00 ± 1.50

20.00 ± 1.10

0.055

波数

2

2

不适用

第 1 波的出现（发情周期的当天）

2.00 ± 1.50

1.00 ± 1.84

0.065

第 1 波中的卵泡数

8.00 ± 1.50

5.00 ± 1.70

0.051

第 1 波的偏差（发情周期的当天）

4.00 ± 1.10

4.00 ± 1.44

0.053

浪1偏差直径（mm）

8.00 ± 1.70

8.00 ± 1.17

0.065

第 2 波的出现（发情周期的当天）

12.00 ± 2.10

12.00 ± 1.50

0.06

第 2 波中的卵泡数

6.50 ± 1.70

6.00 ± 1.90

0.051

第 2 波偏差（发情周期当天）

14.00 ± 2.10

15.00 ± 1.10

0.054

浪2偏差直径（mm）

8.00 ± 1.16

8.80±0.50

0.062

排卵前卵泡直径（mm）

12.00 ± 1.70

11.00 ± 1.50

0.066

表 1。RCC奶牛和小母牛的发情周期和卵泡动力学持续时间。

分别对母牛和小母牛的毛囊结构进行超声观察。RCC 奶牛排卵前卵泡达到的最大直径为 12.00 ± 1.70 mm，小母牛为 11.00 ± 1.50 mm。在这些变量的组之间没有发现显着差异（p > 0.05）（表1）。

比较动物卵泡生长的波数，发现第一波和第二波从出现波到优势卵泡偏离的间隔分别为4.29±1.89、3.29±2.17天；同样，卵泡数为 9.11 ± 2.47 和 8.18 ± 1.86（图 3）。最后，第一波偏差中优势卵泡的直径为 5.00 ± 2.00 mm，第二波为 6.50 ± 1.00 mm。卵泡生长波之间没有统计学差异（p > 0.05）（表2）。

红吉大港奶牛和小母牛都遵循两波卵泡生长。第一波的第一优势卵泡直径在奶牛和小母牛中分别为 11.5 毫米和 10.5 毫米。卵泡生长遵循三个生长阶段，如直径增加（生长期）、保持静止（静止期）和直径减小（减小期）。这是第一项考虑 RCC 中卵泡波数量来表征发情周期和卵巢动力学的研究。在每一波中，选择一个卵泡成为优势卵泡，而队列中的从属卵泡会闭锁 [ 12 ]。在一个发情周期中产生的最后一个卵泡波导致排卵前卵泡，然后是排卵（图 4）。

一个卵泡波的存在与否受 FSH 和雌激素的分泌调节。在牛中，遗传易感性、营养状况或不受控制的环境条件可能在调节一个发情周期内的两个、三个或更多个卵泡波的发生率中起重要作用 [ 13 ] [ 14 ]。以前的研究表明，特定数量的

范围

波1

Wave2

p 值

卵泡数

9.11 ± 2.47

8.18 ± 1.86

0.056

偏差直径 (mm)

5.00 ± 2.00

6.50 ± 1.00

0.06

出现偏差的间隔（天）

4.29 ± 1.89

3.29 ± 2.17

0.055

表 2。RCC奶牛和小母牛卵泡数、偏差直径和出现偏差的间隔。

图 3。发情周期中 RCC 奶牛和小母牛左右卵巢的卵泡数（平均值±标准差）。

图 4。卵巢卵泡的超声图像（a）。毛囊波的启动。(b)。偏离从属卵泡。(c) RCC 奶牛第一波的优势卵泡。(d)。RCC 奶牛第二波排卵卵泡。

发情周期中的卵泡波似乎不受品种、年龄 [ 13 ] 或一年中的季节的影响。然而，三波卵泡模式比例的增加与营养和热应激水平低有关[ 15 ]。本研究的 RCC 奶牛和小母牛表现出具有两种卵泡波模式的发情周期（图 5）。因此，这些结果表明，RCC 奶牛和小母牛的毛囊波模式似乎与在商业 B. taurus 品种的小母牛中观察到的非常相似。虽然影响二波和三波比例的关键因素尚不清楚，但有两个一般假设可以解释决定排卵间期是否出现第三波的卵巢事件。即使排卵间期保持恒定，连续波出现之间的较短间隔可能允许出现更多波，而较长的排卵间期可能允许出现额外的波，即使波之间的间隔是恒定的 [ 12 ]。

3.3. 发情周期RCC的卵泡动力学

用超声机对5头RCC奶牛和5头小母牛进行了检查，观察了奶牛和小母牛在发情周期中的卵泡生长情况，并连续三个发情周期每天记录图像数据。图像存储后每天测量毛囊的直径。已经发现卵泡生长保持波状模式，RCC奶牛和小母牛都表现出两波生长（图5）。

在 RCC 奶牛的情况下，每天观察到的卵泡总数约为 7 ± 1.5 在左侧卵巢中，在右侧卵巢中为 6 ± 1 个，在 RCC 小母牛的情况下，左侧卵巢中为 4 个，右侧卵巢中为 6 个（图 3）。在卵泡波开始的同时，出现了一组小卵泡，它们的直径逐渐增大并变大。在波开始时，卵泡数仍然很高，但随后，卵泡数减少，卵泡直径增加。我们发现随着卵泡直径的增加，卵巢的直径也会增加。卵泡波的数量不影响 CL 在黄体期发育过程中的最大大小和体积，因为排卵卵泡的最大直径在两个卵泡波之间是相似的。

3.4. 测定循环血中 LH、FSH 和 P4 的浓度

从 3 个周期（5 头 RCC 奶牛和 5 头小母牛）的血浆计算的 LH 平均浓度基本值几乎是恒定的。在第 6 天和第 10 天之间，可以看到一些较小但显着的激素浓度升高。LH 浓度在第 11 天到第 13 天下降到低于计算的平均水平，然后再次增加。进一步逐渐增加（P < 0.05），从第 17 天开始超过基础水平，直到第 20 天的排卵前 LH 峰值可以观察到（图 6（a））。排卵前LH值再次

图 5。RCC 奶牛和 RCC 小母牛的卵泡动态（平均值±标准差）。这里，两个蓝色箭头表示静态相位的起点和终点，蓝线表示波 1 和波 2 之间的划分。

降低至基础浓度。FSH 的平均血浆水平（来自 10 只动物的 2 个周期）遵循恒定模式，并且在 RCC 奶牛和小母牛的第 2、3、4 天和第 13、14、15 天左右出现 FSH 峰值（P < 0.05），呈现波浪状模式（图 6 (b))。第 15 天和第 16 天的峰值明显分开。排卵前两天和后三天测定的浓度在血清中始终处于低水平，介于 0.2 和 0.55 ng/ml 血浆之间。从第 4 天开始观察到逐渐增加，并且孕酮水平在排卵后第 10 天左右达到稳定水平。与周期开始时的增加相比，排卵前约 5 天的减少更快（图 6（C））。第 17 天孕酮水平急剧下降，持续约 18 小时。

4。讨论

一般来说，牛发情周期由两个或三个卵泡波组成 [ 13 ]。在这项对 RCC 的研究中，通过经阴道超声监测整个发情周期中的卵巢卵泡动力学，所有研究的 RCC 奶牛和小母牛都显示出两个卵泡波。类似的研究结果表明荷斯坦小母牛在发情周期中普遍存在两个卵泡波周期 [ 16 ]。相比之下，据报道，只有 20% 的荷斯坦小母牛 (B. taurus) [ 17 ] 或 30.10% 的 TNH (B. indicus) [ 18 ] 在每个发情周期中都有两个卵泡波周期，其余的有三个卵泡波周期。

在这项研究中，发现 RCC 小母牛的两个卵泡波周期的排卵间期平均长度为 20.44 ± 0.13 天，而 RCC 奶牛为 21 ± 1.5 天。与巴哈曼小母牛（0.2 ± 0.1 天和 10.0 ± 0.4 天）相比，RCC 的两个卵泡波周期（第 1.53 ± 0.17 天和第 11.02 ± 0.2 天）的第一个和第二个卵泡波出现较晚。然而，在 Nelore 牛的两个波周期（第 1.50 ± 0.15 天和第

图 6。(a) 黄体生成素 (LH) (mIU/ml)、(b) 促卵泡激素 (FSH) (mIU/ml) 的循环血浓度测定；(c) RCC 奶牛和小母牛发情周期期间的孕酮 (P4) (ng/ml) (平均值 ± SD)。

12.0 ± 0.91) [ 9 ]。此外，具有两个波周期（12.44 ± 0.08 和 8.07 ± 0.06）的 RCC 中第一和第二滤泡波的长度与 Nelore 牛报道的相似（14.75 ± 0.70 和 9.05 ± 0.69）[ 9 ]弗里斯兰和赫里福德小母牛 (14.25 ± 2.86 和 9.0 ± 1.08) [ 17 ]。

目前研究的数据表明，RCC 的两个卵泡波周期中的第一个卵泡波长往往比 Nelore 的短，并且在弗里西亚和赫里福德小母牛之间交叉。在 Nelore 牛的所有两个卵泡波周期中，排卵波都比第一个卵泡波短，在本研究中，排卵波也比第一个卵泡波短。在 RCC 小母牛中观察到的优势卵泡 (DF) (8 - 9 毫米) 和在 RCC 奶牛中观察到的最大卵泡 (DF) 的最大直径 (10 - 11 毫米) 小于在 Nelore 小母牛中观察到的最大直径 (10 - 12 毫米) [ 9 ], Holstein小母牛 (14 - 20 毫米) [ 17 ] 和婆罗门小母牛 13 - 18 毫米 [ 16]。然而，直径与中国黄牛报告的 DF 平均大小（8 - 9 mm）相似，而 RCC 中两个卵泡波周期的 CL 最大直径的平均值（13.55 ± 0.17 小母牛和 15.14 ± 0.14 毫米的奶牛）比在 Nelore（~17 - 18 毫米）[ 10 ] 和婆罗门小母牛（18 - 19 毫米）[ 17 ] 中观察到的小。CL 的最大直径小于荷斯坦小母牛 (20 - 25 毫米) [ 17 ]。因此，RCC 卵巢中 DF 和 CL 的大小小于 B. indicus 牛（Nelore 和 Brahman 小母牛）和 B. taurus（Holstein），但 DF 的生长和周转模式相似。

RCC 的两个卵泡波周期（8.24 ± 0.56 和 9.51 ± 0.68 天）的排卵卵泡 (OF) 的生长持续时间与具有两个和三个卵泡波周期的 Nelore 牛（8.65 ± 0.73 和 7.0 ± 0.51 天）相当) [ 9 ] 和具有两个和三个卵泡波周期的荷斯坦小母牛 (7.50 ± 0.19 和 5.90 ± 0.30 天) [ 17 ] 和 10.9 ± 0.40 和 6.31 ± 0.69 天 [ 19]。然而，在 RCC 中 OF 和其他 DF 的生长速度（~0.80 mm/天）比 Nelore 牛（~0.92 mm/天）和欧洲品种（1.4 - 2.0 mm/天和 1.8 - 2.2 mm/天）慢。因此，RCC 的 DF 比 Nelore 牛和荷斯坦小母牛的 DF 更小，卵泡生长速度更慢。RCC 中 SF 的最大直径 (~4.50 - 6.69 mm) 小于 Nelore 牛 (~6 - 7 mm) [ 9 ] 和荷斯坦小母牛 (6.3 ± 0.8 mm, 7.4 ± 0.6 mm [ 19 ] 和 8 - 9 mm [ 13]。在这项研究中，从属卵泡 (SF) 在 RCC 中的大小约为 DF 的一半。此外，通过卵巢超声检查确定的 RCC 平均卵泡直径 (~8 - 9 mm) 与中国黄牛 (~9 mm) 相似。相比之下，平均卵泡直径小于报道的 Nelore 奶牛和小母牛（~22 毫米），略小于报道的欧洲牛（~25 毫米）。其他基于卵巢重量、体重或通过直肠触诊的报告表明，RCC 牛的卵巢比 B. taurus 牛的卵巢小。RCC 中第一次卵泡波募集的卵泡数量（5-7 个卵泡）低于 Nelore（14-15 个卵泡）[ 20 ]、Brahman（13-14 个卵泡）[ 16 ]] 和荷斯坦小母牛 (15 - 16 个卵泡) [ 21 ]。卵泡偏差被定义为波浪出现后最大卵泡之间生长速率差异变化的开始，被认为是卵泡选择的关键组成部分 [ 22 ]。在本研究中观察到的 RCC 排卵后卵泡偏差（第一个卵泡波出现 1.53 天）与 Nelore 小母牛的不同 [ 23] 和荷斯坦奶牛。在荷斯坦小母牛中，卵泡偏差发生在排卵或出现波后 2.2 至 2.8 天之间。由于 RCC 中第一个卵泡波通常在排卵后 24 小时才出现，因此，TNH 中卵泡偏离似乎比 Nelore 和 Holstein 女性更早出现。此外，在荷斯坦小母牛中也报道了类似的结果，其中两个卵泡波周期的波之间间隔为 9 天，而三个卵泡波周期的波之间的间隔约为 7 天 [ 19 ]。

RCC小母牛和奶牛两个卵泡波周期的发情周期FSH浓度分别为0.96-2.25 mIU/mL和1.13-2.32 mIU/ml。此外，RCC 母牛和小母牛中 FSH 的浓度几乎相似，没有观察到显着差异。在 RCC 奶牛中，也发现了稍高的 FSH 浓度。在本研究中，FSH 浓度在偏离前 48 至 24 小时下降，并在偏离后 24 至 96 小时保持在基础水平，这与 B. taurus 雌性很好。在本研究中，P 4浓度从排卵后第 1-2 天的 <1 ng/ml 逐渐增加到第 4-6 天的大约 ≥27 ng/ml，因此在第一个卵泡波中开始出现卵泡偏差。有趣的是，随着动物的持续维持，P 4浓度在排卵期间下降到 < 1 ng/ml。P 4在卵泡波发育中的作用尚不清楚，但有报道称 P 4可能对卵泡发育有直接影响或可能影响 LH 分泌 [ 14 ]，而 P 4与卵泡偏差的关系可能只是一个不反映因果关系的时间关联 [ 20]。此外，卵泡偏差的动态不受循环 P 4浓度的影响 [ 24 ]。

5. 结论

RCC 是孟加拉国最有前途的本土牛品种，与其他本土牛相比，具有许多优越的特性。然而，迄今为止还没有关于 RCC 中卵泡发育的研究。本研究研究了 RCC 小母牛和奶牛在自然发情周期中的卵泡动力学，与卵泡波和 P 4、LH 和 FSH 的循环浓度有特殊联系。RCC 奶牛和小母牛的卵巢卵泡动力学模式遵循两种波动模式。此外，RCC 奶牛和小母牛每波募集的卵泡数量不同，RCC 小母牛每个卵泡波的出现较晚，与 RCC 奶牛相比，排卵间期的长度更短。4 _，通过ELISA测定的与卵泡大小相关的FSH和LH浓度在控制卵泡发育和确定发情周期是否有两个或三个卵泡波周期方面具有重要作用。这些研究将帮助我们了解在发情周期以及卵泡发育和排卵期间调节卵泡波发展的机制。RCC 中卵巢卵泡发育波动现象的记录将为其他本地牛发情周期中的卵泡发生提供新模型。预计在发情周期中对卵泡波的了解将对牛不育症的诊断和治疗（例如重复繁殖）产生深远的影响。

资金

该研究项目得到了孟加拉国家畜研究所 (BLRI) 的 RCC 改进和保护项目 (第二阶段) 的支持, 萨瓦尔, Dhaka-1341, 孟加拉国。

利益冲突

作者声明与本文的发表没有利益冲突。

参考

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